长时间的仿生栽培和生态研究(jiū),使得羊肚菌的发生规律和(hé)生(shēng)理需(xū)求逐(zhú)渐为人们所(suǒ)掌握。一些羊肚菌爱好(hǎo)者和科(kē)技(jì)工作者开始意识(shí)到菌(jun1)种(zhǒng)在羊(yáng)肚菌驯化栽培中的重要性。这是从仿生栽培向人工栽培的重要转变。
菌种(zhǒng)的驯化(huà)选育、补料技(jì)术和(hé)人为(wéi)刺激诱发出菇是(shì)羊(yáng)肚菌人工栽培区(qū)别于仿生栽培的重要标志。
实际上,20世纪80年代,美国科学家Ower就模(mó)拟自然环境在(zài)实(shí)验室(shì)内成功实现了羊(yáng)肚菌出(chū)菇(gū)[33~36],随后由其合作者Mills进行了相对成功的工厂(chǎng)化(huà)栽培应用[4]。
无论是民间(jiān)还是官方资(zī)料都显(xiǎn)示,我国(guó)的羊肚菌人(rén)工栽(zāi)培技(jì)术(shù)都明显晚于Ower的技术专利。
蔡知桂等在2010年公布了一种羊肚菌栽培(péi)技术专(zhuān)利(lì)[37],技术(shù)流程依次为栽培种的制(zhì)作(zuò)、培养料的制备、播(bō)种、发菌管理(lǐ)及出(chū)菇(gū)管(guǎn)理等。值(zhí)得注意的是,该专利(lì)要求在(zài)菌丝成熟之前(qián)至少进行(háng)一次营养液补充,这可以认为是羊肚菌(jun1)仿生栽培向纯人工栽(zāi)培的过(guò)渡。赵琪等公(gōng)布(bù)了一种梯棱羊肚菌(jun1)栽培方案和菌种制作方案的专利技(jì)术(shù),首次提及(jí)所用的菌种(zhǒng)是(shì)经过(guò)分子鉴定的(de)梯棱羊(yáng)肚(dù)菌(M.importuna)[38,39]。
2.1 菌种的选择
羊肚(dù)菌子囊果具有明显的形(xíng)态可塑(sù)性,因此其物种的鉴(jiàn)定一直是一个难题。早期对
羊肚(dù)菌菌种的(de)选择和(hé)确定大多根据形态特征,保(bǎo)留下来的模式标本和数据资料有限,因此,很难推定早期(qī)资(zī)料中的所用品种和现代(dài)分类系统(tǒng)的对应关系。近年来(lái),应用分子系统(tǒng)发育学鉴定羊肚菌(jun1)物种得到广泛的(de)认可[40~43]。王(wáng)波和鲜灵对四(sì)川(chuān)大邑(yì)县、崇州市(shì)、郫(pí)县和涪城区(qū)的人工栽培品种进行形态特(tè)征的详(xiáng)细描述和分子鉴定,结果发现,所有羊肚菌品种的ITS-DNA序列与(yǔ)数据库中梯棱羊肚菌相似度达100%,而与羊肚菌属(shǔ)的其他物种相差甚远[44]。赵(zhào)琪等在公开的(de)羊肚(dù)菌栽培专利中(zhōng)指出(chū),所用(yòng)的品种为梯棱羊肚菌[38,39]。
自2012年起,我们(men)在(zài)全国各地进行羊肚菌的驯化栽培(péi)和标本采集整理工作,随后对来源(yuán)清晰的4个商业推广菌株羊(yáng)肚菌1号、3号、6号和7号进行了详(xiáng)细的(de)形态特征记录和DNA序(xù)列分子鉴定分析。结(jié)果表明,羊肚菌1号(hào)和3号是梯(tī)棱羊肚菌,6号为(wéi)六(liù)妹羊肚菌(M.
sextelata),7号为七(qī)妹(mèi)羊肚菌(M.septimelata),均(jun1)属于黑色羊肚菌(jun1)支系[43]。其他品种是否可用于驯化栽培有待进行(háng)深入研究,建议生产(chǎn)者(zhě)在开展羊肚(dù)菌人工(gōng)栽培(péi)时,应定向采集当前(qián)已经应用的品种(zhǒng),经初筛、小试和(hé)中试后,再进行大(dà)面积的(de)示范性栽培和推广。
2.2 补料(liào)技术
在有目的有意识驯化菌种的基(jī)础(chǔ)上,“外源营养袋”的出现和广(guǎng)泛使用促进了羊肚(dù)菌产业(yè)的健康发展,外源营养袋技术(shù)是羊(yáng)肚菌(jun1)生产环节中的最重(chóng)要技术处理,是羊肚(dù)菌丰产的(de)最重要“能量”支撑。
Ower曾详(xiáng)细论述外源营养袋的技术原理(lǐ)和制作工(gōng)艺(yì),但在随(suí)后的推(tuī)广应用中,并未被重视和使用(注:Ower于1986年逝世,后(hòu)期的推广由合作者Mills进行)。Ower对其(qí)原(yuán)理(lǐ)和适用方法的解(jiě)释(shì)是羊肚菌需要(yào)在(zài)营养相对(duì)贫乏的环境中才(cái)能进行有(yǒu)性生殖(zhí),而其菌丝自身储备的能量不足以支撑(chēng)其(qí)有(yǒu)性生殖过程,因(yīn)此需要从外界吸(xī)收新的营(yíng)养物质,同时需要(yào)在生产后期对(duì)新的营养物质予以(yǐ)移除,以使菌丝重新回(huí)到营养贫乏(fá)状态转而进行有性生殖。Ower利用培养菌(jun1)核的培养料作为“外源性营养物”进行补料操作[34~36]。
我国谭方(fāng)河先生最早(zǎo)使用外源营养(yǎng)袋技术[4]。约2000年前(qián)后,出于“不同菌(jun1)丝的(de)配合”(不同“极性(xìng)”的菌丝杂合)可能(néng)有助于出菇的认识(shí),在菌丝萌发后,他采取在菌床上扣上接种有另一类型羊肚菌菌种的菌(jun1)袋,以实现两种菌丝的(de)融(róng)合,诱发出菇(gū),此(cǐ)方法(fǎ)比不“杂交(jiāo)”具有明显的增(zēng)产效果,该(gāi)技(jì)术在早期曾(céng)被称(chēng)为“菌(jun1)丝融合技术”。随后,谭方河先生又发(fā)现,只扣料袋(不接种)同样可以促进增产(chǎn),因此就推翻了“菌丝融合的(de)说法”,进而发展成为现今(jīn)的外源营养袋技术。
2.3 保育催(cuī)菇
催菇是羊肚(dù)菌栽培的(de)重要环节(jiē),技术性较强,其目的(de)是创造不利于羊肚菌继续营养生长的条件,使其转(zhuǎn)向生殖(zhí)生长,其中包括营养、水分、湿度、温度、光线等(děng)刺激。
①营养刺激是(shì)指通(tōng)过移除营养实现营(yíng)养刺激,该技(jì)术也(yě)是Ower专利中强调的环节,可行的操作是,外源(yuán)营养袋施(shī)放后20~25天移(yí)除外源营养(yǎng)袋[34~36]。
②水分刺(cì)激是(shì)自(zì)然界大型真菌(jun1)出菇的重要条件(jiàn)。水分可冲(chōng)刷真菌分泌的各种酶(méi)类物(wù)质,改变菌丝渗(shèn)透(tòu)压,也(yě)是菌丝转向生(shēng)殖生长所需(xū)要湿(shī)润环境的重要保(bǎo)证(zhèng)。具体做法(fǎ)是:撤袋之后,大水浇灌,至地面(miàn)完全(quán)湿(shī)透(tòu)[1]。
③湿度控制(zhì)包(bāo)括土壤含水量和空气相对湿度,水分刺激使土壤含(hán)水量(liàng)达到饱(bǎo)和,随后控制(zhì)土壤水分在(zài)20%~30%,原基(jī)发生(shēng)前空气(qì)湿度在85%~95% [1]。
④目前没(méi)有数据直接支持温差刺激实现羊肚(dù)菌的生(shēng)殖生(shēng)长(zhǎng),但大量数据表(biǎo)明,10 ℃左(zuǒ)右的昼夜温差,有(yǒu)助于羊(yáng)肚菌出菇。主(zhǔ)要通过白天闭棚(péng)增(zēng)温,晚间掀开棚(péng)通风降温(wēn)以加大(dà)温差[1]。
⑤栽(zāi)培经验表明,光线也是影响出菇的一个(gè)重(chóng)要指标,过(guò)强(qiáng)会抑制出菇,可行(háng)的操作(zuò)是使(shǐ)用4~6针的遮(zhē)阳网进行(háng)遮阴(yīn)处理。